Makalah Kultur Pisang

BAB I

PENDAHULUAN

1.1  Latar Belakang

Pisang yaitu flora yang termasuk dalam famili Musaceae yang merupakan komoditas bernilai ekonomi tinggi di Indonesia. Propinsi Kalimantan Selatan merupakan salah satu kawasan produksi dan wilayah potensial dikembangkannya tumbuhan pisang. Oleh lantaran jenisnya yang beranekaragam pisang banyak dimanfaatkan oleh masyarakat mulai dari bentuknya yang berupa pangan menyerupai pisang goreng, jumput-jumput pisang, kolak pisang, dan lain sebagainya. Pisang juga dimanfaatkan dalam pembuatan kerajinan rakyat menyerupai anyaman topi, tas, dan lainnya.

Jenis pisang yang dikenal di Kalimantan Selatan antara lain pisang menurun (kapok), pisang mauli(uli), pisang talas dan pisang raja. Pisang kepok dan talas sering dikonsumsi oleh masyarakat dalam bentuk kolak pisang atau pisang goring, sedangkan pisang mauli (uli) sering dihidangkan sebagai pencuci ekspresi dalam program selamatan dan perkawinan.

            Kendala pengadaan bibit unggul secara konvensional yaitu sulit mendapat bibit  yang berkualitas dalam jumlah besar dalam waktu yang singkat. Salah satu keunggulan perbanyakan tumbuhan melalui teknik kultur jaringan yaitu sangat dimungkinkan mendapat materi tanam dalam jumlah besar dalam waktu singkat (Priyono et al., 2000).

            Dalam kultur jaringan pisang, hingga ketika ini yang banyak dikenal yaitu kultur dengan eksplan bonggol. Apabila dibandingkan dengan jantung pisang maka mendapatkannya lebih gampang dan jumlah eksplan yang di sanggup lebih banyak bahkan mencapai 200 eksplan setiap jantung pisang, serta lebih kecil resikonya terhadap kontaminasi alasannya yaitu bukan berasal dari tanah dan tertutup rapat oleh kelopak.

1.2 Tujuan dan Manfaat               

Tujuan

1. Untuk menemukan teknik perbanyakan bibit pisang abaca dengan pinjaman zat pengatur tumbuh BAP, Kinetin dan NAA pada media propagasi.
2.  Untuk mengetahui imbas interaksi antara gabungan NAA dan Kinetin terhadap pertumbuhan tiga kultivar buah pisang secara teknik kultur jaringan.
3. Untuk mengetahui perkembangan meristem  pisang barangan (Musa paradisiaca L.) dalam media MS dengan banyak sekali kombinasi zat pengatur tumbuh(ZPT) NAA, IBA, BAP, dan kinetin.

Manfaat

Manfaat dari makalah ini sebagai media untuk menambah wawasan dan pengetahuan penulis mengenai kultur jaringan pisang abaca, media yang dipakai dan perkembangan meristem pisang barangan.

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Pisang

Pisang berasal dari bahasa Arab yaitu maus dan berdasarkan Linnaeus termasuk keluarga Musaceae (Satuhu dan Supriyadi, 1999). Pisang barangan merupakan pisang yang paling terkenal di Sumatera Utara (Nuswamarhaeni, dkk, 1999, hlm. 56). Indonesia merupakan salah satu negara penghasil tumbuhan pisang dengan tingkat keragaman yang sangat tinggi dan tersebar di seluruh kawasan di Indonesia. Pisang Barangan yaitu salah satu jenis pisang yang sangat digemari oleh konsumen meskipun harganya lebih mahal dibandingkan jenis lainnya (Nainggolan dkk, 2002 dalamWahyudi, 2004).

Adapun botani tumbuhan pisang yaitu sebagai berikut: flora seperti

pohon, tinggi 2-9 m; batang pendek dalam tanah yang disebut Corm; mempunyai

kuncup-kuncup tunas yang karenanya bermetamorfosis anakan. Akar liar (adventif) tumbuh menyebar secara lateral, sanggup mencapai panjang 4-5 m. Batang yang di atas permukaan tanah yaitu batang semu yang merupakan kumpulan dari pelepah daun yang berdaging, membentuk suatu bentuk silindris dengan diameter 20-50 cm. Daun gres yang terbentuk tumbuh dari batang semu. Helai daun berbentuk oblong yang besar dengan panjang 150-400 cm dengan lebar 70-100 cm. Bila bunga beragam telah terbentuk di ujung batang semu, maka pembentukan helai daun gres akan berhenti. Bunga beragam terkumpul menjadi beberapa kelompok (sisir) dan setiap kelompok didukung oleh daun penumpu yang besar, berwarna merah dan di dalamnya terdapat dua baris bunga. Keseluruhan kelompok bunga ini bersatu dalam bentuk menyerupai jantung, sehingga disebut sebagai jantung pisang. Daun penumpu dari setiap kelompok bunga akan luruh sesudah terjadinya proses perkembangan buah (Sudarnadi,1996, hlm. 85).

Menurut Steenis (2003), kedudukan pisang barangan dalam taksonomi adalah:

Kingdom : Plantae, Divisio : Spermatophyta, Sub Divisio : Angiospermae, Kelas : Monocotyledoneae, Ordo : Zingiberales, Famili : Musaceae, Genus : Musa, Spesies : Musa sp.

Tanaman pisang termasuk tumbuhan iklim tropis lembap yang gampang didapatkan di Indonesia, tumbuhan ini tahan hidup di trend kemarau, bisa tumbuh danmberproduksi baik pada banyak sekali jenis tanah pada ketinggian tempat antara 0-1000 m diatas permukaan laut. Tanaman pisang gampang tumbuh di banyak sekali tempat sehingga penanaman yang dilakukan oleh petani belum teratur dan sering dicampur dengan tumbuhan lainnya. Selain itu pemeliharaan tumbuhan pisang belum dilakukan secara intensif, sehingga produksi dan mutu buah yang dihasilkan masih rendah (Warda dan Hutagalung, 1994).

2.2. Teknik Kultur Jaringan

Kultur jaringan dalam bahasa asing disebut sebagai tissue culture, weefcel

cultuus atau gewebe kultur. Kultur yaitu budidaya dan jaringan yaitu sekelompok sel yang mempunyai bentuk dan fungsi yang sama. Maka, kultur jaringan berarti membudidayakan suatu jaringan tumbuhan menjadi tumbuhan kecil yang mempunyai sifat menyerupai induknya (Suryowinoto, 1991 dalam Hendaryono dan Wijayani, 1994). Manfaat perbanyakan tumbuhan secara kultur jaringan yaitu untuk perbanyakan vegetatif tumbuhan yang permintaannya tinggi tetapi pasokannya rendah, lantaran laju perbanyakan secara konvensional dianggap lambat. Di samping itu, perbanyakan tumbuhan secara kultur jaringan sangat bermanfaat untuk memperbanyak tumbuhan introduksi, tumbuhan klon unggul baru, dan tumbuhan bebas patogen yang perlu diperbanyak dalam jumlah besar dalam waktu yang relatif singkat (Yusnita, 2003, hlm. 9).

Perbanyakan bibit secara cepat yaitu salah satu dari penerapan teknik kultur jaringan yang telah dilakukan terutama untuk beberapa jenis tumbuhan yang

diperbanyak secara klonal. Tujuan utamanya yaitu memproduksi bibit secara massal dalam waktu singkat. Hal ini terutama dilakukan pada tanaman-tanaman yang persentase perkecambahan bijinya rendah. Tanaman bibit unggul yang berasal dari tetua yang memperlihatkan sifat male sterility, hibrida-hibrida yang unik, perbanyakan pohon elite dan/atau pohon untuk batang bawah dan tumbuhan yang selalu diperbanyak secara vegetatif menyerupai kentang, pisang dan strawberry juga diperbanyak secara kultur jaringan (Gunawan, 1987 dalam Mattjik, 2005, hlm 17).

Tujuan lain dari kultur jaringan yaitu untuk membiakkan potongan tumbuhan dalam ukuran yang sekecil-kecilnya sehingga menjadi beratus-ratus ribu tumbuhan kecil (klon), dan untuk menghasilkan kalus sebanyak-banyaknya biar sanggup menghasilkan metabolit sekunder, contohnya untuk keperluan obat-obatan.

Perbanyakan secara kultur jaringan dilakukan dengan cara mengisolasi bagian

tanaman menyerupai organ, jaringan, kumpulan sel, sel tunggal, protoplasma, dan

kemudian menumbuhkan bagian-bagian tersebut dalam media buatan aseptik yang

kaya nutrisi dan mengandung zat pengatur tumbuh. Proses ini berlangsung di dalam wadah tertutup yang tembus cahaya sehingga bagian-bagain tersebut memperbanyak diri dan beregenerasi kembali menjadi tumbuhan lengkap (Saptarini, dkk, 2001, hlm. 23).

2.2.1 Zat Pengatur Tumbuh

Di dalam badan tumbuhan, zat pengatur tumbuh mempunyai peranan dalam

pertumbuhan dan perkembangan demi kelangsungan hidupnya. Zat pengatur tumbuh pada tumbuhan (plant regulator), yaitu senyawa organik, yang dalam jumlah sedikit sanggup merubah proses fisiologi flora (Abidin, 1982).

Perkembangan kalus dikendalikan oleh hormon yang ditambahkan ke dalam

media, khususnya auksin dan sitokinin. Perubahan kadar zat pengatur tumbuh sanggup menghipnotis morfogenesisi kalus menjadi tumbuhan utuh atau organ-organ saja. Keseimbangan hormon yang dibutuhkan merupakan hal penting untuk setiap spesies dan sering sangat bermacam-macam antara kultivar satu dengan yang lain. Bila keseimbangan auksin/sitokinin dalam medianya tepat, maka kelompok kalus akan segera terbentuk (Nasir, 2002, hlm. 33).

Berdasarkan struktur kimia ada dua kelompok sitokinin yaitu turunan

adenin (BAP, kinetin, zeatin) dan turunan fenilurea (Thidiazuron/TDZ). BAP dan

TDZ mempunyai respon fisiologis yang sama yaitu berperan dalam regulasi pembelahan sel, deferensiasi pertumbuhan jaringan dan organ serta biosintesa

klorofil (Murthy et al. 1995). Pengaruh penggunaan TDZ dalam perbanyakan in

vitro di antaranya yaitu meningkatkan biosintesis atau akumulasi sitokinin dan

auksin endogen, menginduksi embrio somatik tanpa dikombinasikan dengan zat

pengatur tumbuh lainnya, merangsang proliferasi tunas dan regenerasi organ

adventif (Huetteman dan Preece, 1993).

2.2.1.1 Sitokinin/ BAP

Adenin merupakan bentuk dasar yang memilih terhadap acara sitokinin. Didalam senyawa sitokinin, panjang rantai dan hadirnya suatu ikatan ganda dalam rantai tersebut, akan meningkatkan acara zat pengatur tumbuh ini (Abidin, 1982, hlm.55). Secara umum, konsentrasi sitokinin yang dipakai berkisar dari 0.1 – 10 mg/l. Dalam perkara tertentu, konsentrasi kinetin hingga 30 mg/l pernah digunakan, tetapi jarang terjadi (Gunawan, 1995). Pengaruh sitokinin dalam kultur jaringan tumbuhan antara lain berafiliasi dengan proses pembelahan sel, proliferasi tunas ketiak, penghambatan pertumbuhan akar dan induksi umbi. Pembelahan mitosis tidak akan terjadi kalau tidak ada sitokinin.

Sitokinin terutama berperan di dalam pembentukan benang gelendong pada metafase (Wattimena, 1992 dalam Nasution, 2003).

Menurut Santoso dan Nursandi (2004, hlm. 105), bahwa secara lebih luas

peran sitokinin sanggup dijabarkan sebagai berikut:

1. Sitokinin berperan dalam memacu pembentangan sel, pembesaran dan

pembelahan sel.

2. Sitokinin berperan dalam penundaan senesens (penuaan), caranya dengan

jalan sitokinin menghambat penguraian protein. Penuaan terjadi karena

penguraian protein menjadi asam amino oleh enzim-enzim protese, RNAse,

DNAse. Artinya di sini penghambatan atau penundaan penuaan terjadi karena

kinerja enzim-enzim di atas dihambat sitokinin sehingga umur protein lebih

panjang.

3. Sitokinin ini berperan mengarahkan transpor zat hara, yaitu memberi signal ke

arah mana zat hara akan dibawa atau ditransport.

4. Peran sitokinin yang lain adalah: mendorong proses morfogenesis, pertunasan,

pembentukan kloroplas, pembentukan umbi pada kentang, pemecahan

dormansi, pembukaan stomata, dan pembungaan.

5. Dalam kegiatan kultur jaringan sitokinin telah terbukti sanggup menstimulasi

terjadinya pembelahan sel, proliferasi kalus, pembentukan tunas, mendorong

proliferasi meristem ujung, menghambat pembentukan akar, mendorong

pembentukan klorofil pada kalus, golongan sitokinin yang sering ditambahkan

dalam medium antara lain adalah: kinetin, zeatin, dan Benzil Amino Purin (BAP) (Hendaryono dan Wijayani, 1994). Penggunaan BAP dengan konsentrasi tinggi dan masa yang panjang seringkali mengakibatkan regeneran sulit berakar dan sanggup mengakibatkan penampakan pucuk yang abnormal(Gunawan, 1995 hlm 45).

2.2.1.2 Auksin/NAA

Istilah auksin pertama kali dipakai untuk menyebut suatu senyawa yang mungkin sanggup mengakibatkan pembengkokan koleoptil ke arah cahaya ( Salisbury dan Ross,1992) Indolacetic Acid (IAA) yaitu auksin endogen atau auksin yang terdapat pada tumbuhan (Wattimena, 1988, hlm. 7). Adapun zat pengatur tumbuh yang digolongkan sebagai auksin sintetis, yaitu: asam a-naftalenaasetat (NAA), asam 2,4-diklorophenoksi asetat (2,4-D), asam 2- metil-4-klorophenoksi asetat (MCPA), asam 2-naftalosiasetat (NoA), asam 4-klorophenoksi asetat (4-CPA), asam p-klorophenoksi asetat (PCPA), asam 2,4,5-triklorophenoksi asetat (2,4,5-T), asam 3,6-dikloroanisik (dikamba), asam 4-amino-3,5,6-trikoloropikolinik (Santoso dan Nursandi, 2004, hlm.98).

Pada konsentrasi yang rendah, auksin kuat baik pada proses pemanjangan sel (Abidin, 1982). Sebaliknya, dalam konsentrasi yang terlalu tinggi auksin justru sanggup menghambat perpanjangan tanaman. Oleh lantaran itu, penggunaan auksin harus sungguh-sungguh memperhatikan takaran yang dianjurkan ( Salisbury dan Ross, 1992 dan Widarto, 1996).

2.2.2 Eksplan

Eksplan yaitu potongan kecil jaringan atau organ yang dipisahkan dari tumbuhan induk kemudian dikulturkan (Katuuk, 1989). Bagian tumbuhan yang sanggup dikultur yaitu selsel muda (meristematis), sanggup berupa sel, jaringan apapun, organ, buah, biji, serbuk sari, ovum (telur), ovulum (bakal buah), dan lain-lain. Bahkan sel tunggal yang berasal dari sel somatik dan protoplas juga sanggup dikulturkan (Muslim, 2003, hlm. 348). Dalam pemilihan potongan tanaman, perlu juga dipertimbangkan tujuan dari kulturnya. Bagian-bagian tertentu akan memperlihatkan variasi dalam jumlah kromosom maupun variasi dalam beberapa gen. Endosperma hanya dipakai untuk mendapat kultur yang triploid. Selain potongan tanaman, genotip atau varietas yang dipakai juga ikut memilih keberhasilan regenerasi (Gunawan, 1995, hlm. 41). Dalam kultur jaringan, sumber eksplan harus berasal dari pohon induk terpilih. Hal ini seringkali sanggup menjadi hambatan dalam proses produksi materi pangan melalui kultur jaringan (Priyono, 2000).

2.2.3 Media Kultur Jaringan

Faktor penentu di dalam media tumbuh yaitu komposisi garam anorganik, zat pengatur tumbuh, dan bentuk fisik media. Komposisi garam anorganik telah

dikembangkan oleh para ahli. Ada yang tinggi konsentrasi garamnya, ada yang

sedang dan ada yang rendah (Gunawan, 1995, hlm. 42). Pada media aseptik yang mengandung unsur hara makro dan mikro, Fe, vitamin, dan zat pengatur tumbuh yang dibutuhkan tanaman, sel atau jaringan tersebut akan membelah dan membentuk kalus atau organ tumbuhan secara langsung (tunas atau akar). Selanjutnya kalus ini akan distimulasi untuk membentuk tumbuhan tepat (Haryanto, 1991 dalam Marlina, 2004).

Unsur makro yang dimaksud yaitu : C, H, O, N, S, P, K, Ca, Mg dan

unsur-unsur mikro yaitu : Zn, Mn, Cn, Bo, Mo, Si, Al, Cl, Co dan Fe. Unsurunsur tersebut diberikan bukan dalam bentuk unsur murni tetapi dalam bentuk garam. Sebelum dipakai garam-garam tersebut harus dicampur dengan air suling (akuades) (Widarto, 1996, hlm. 127).

2.2.4 Kultur Jaringan Pisang

Kultur jaringan yaitu suatu perjuangan untuk menumbuhkan sel, jaringan, dan organ tumbuhan pada medium buatan secara aseptik dalam lingkungan yang terkendali. Pengadaan bibit dengan cara ini, sangat sesuai untuk perjuangan pisang dalam skala besar (industri). Pada umumnya media yang dipakai dalam kultur jaringan pisang ini yaitu MS (Roedyarto, 1999 dan Gunawan, 1995).

Pisang umumnya diperbanyak dengan anakan. Anakan yang berdaun pedang

lebih disenangi petani, alasannya yaitu pohon pisang yang berasal dari anakan demikian akan menghasilkan tandan yang lebih besar pada panen pertamanya (tanaman induk). Bonggol atau potongan bonggol juga dipakai sebagai materi perbanyakan. Tetapi jantung pisang juga merupakan eksplan yang menguntungkan lantaran gampang mendapatkannya dan resiko kontaminasi lebih kecil lantaran bukan berasal dari tanah dan tertutup rapat oleh kelopak bunga (Nisa dan Rodinah, 2005). Kini telah dikembangkan kultur jaringan untuk perbanyakan secara cepat, melalui ujung pucuk yang bebas-penyakit. Cara ini telah dilaksanakan dalam skala komersial, tetapi adanya mutasi yang tidak dikehendaki menimbulkan kekhawatiran. Dalam perbanyakan bibit pisang secara kultur jaringan, ada empat tahap yang harus dilalui yaitu, pertama, tahap inisiasi. Pada tahap ini eksplan membentuk kalus dan bertunas banyak. Kedua, tahap pelipatan tunas (multiplikasi) yaitu tunas yang sudah terbentuk dipisahkan kemudian ditumbuhkan dalam medium biar tumbuh tunas gres (perbanyakan sub kultur). Ketiga, tahap perakaran tunas (regenerasi planlet) dan tahap terakhir yaitu tahap aklimatisasi lingkungan (Sunarjono, 2002 dalam Wahyudi,2004, hlm. 7).

BAB III

BAHAN DAN METODE

3.1  Bahan dan Alat

Bahan yang dipakai dalam penelitian ini meliputi: anakan pisang Abaca, jantung pisang barangan, anakan pisang barangan, agar sebagai pemadat, sukrosa, NAA, Kinetin, IBA BAP, desinfektan (Sunclin, Dithane, Alkohol 70% dan 95%, Betadine dan Aquadest steril), alkohol, 96%, HCl pekat, NaOH, aquades, deterjen, clorox, dan air steril dan materi lain yang mendukung penelitian ini. Media dasar yang dipakai yaitu media MS (Murashige and Skoog) ditambah dengan beberapa rasio konsentrasi BAP, NAA dan Kinetin.

            Alat yang dipakai dalam penelitian ini yaitu peralatan gelas (botol kultur, gelas ukur, beaker glass, Erlenmeyer, dan petridish), timbangan analitik, pH meter, autoclave, Laminar Air Flow (LAF), peralatan diseksi (pinset, gunting dan scalpel), stirrer, lampu spiritus, rak kultur dengan lampu 40 watt dan alat lain yang mendukung penelitian ini.

3.2 Metode Kerja

Jurnal 1

            Penelitian terdiri dari 2 tahap yaitu tahap induksi tunas dan tahap pengakaran tunas mikro. Tahap induksi tunas disusun secara acak lengkap dengan 5 ulangan dan 4 perlakuan konsentrasi BAP yaitu 4 ppm, 5 ppm, 6 ppm, dan 7 ppm. Secara pararel tahapan yang sama dilakukan dengan perlakuan Kinetin. Tahap pengakaran tunas mikro  disusun hanya dengan 1 faktor dan 3 ulangan. Dengan memakai 4 taraf konsentrasi NAA yaitu 0 ppm, 1 ppm, 1,25 ppm dan 1 ppm. Eksplan yang dipakai berupa tunas abaka dari kultur steril. Eksplan dikulturkan pada media MS yang diperkaya dengan zat pengatur tumbuh sesuai perlakuan.

Jurnal 2

Penelitian ini disusun berdasarkan rancangan acak lengkap (RAL) factorial memakai 2 faktor, factor pertama yaitu zat pengatur tumbuh (a) yang terdiri dari 6 taraf konsentrasi. Factor kedua yaitu kultivar pisang (b) yang terdiri dari 3 taraf.

Jurnal 3

Rancangan penelitian yang dipakai yaitu rancangan acak lengkap(RAL) non faktorial dengan 9 perlakuan komposisi zat pengatur tumbuh dalam media.

Inokulasi eksplan

Sebelum penanaman, LAFC disterilkan dengan alkohol 96% dan dilakukan pentinaran lampu UV selama 10 menit.  Kemudian dipotong meristem pucuk dengan scalpel ± 1 cm³, dan eksklusif ditanam pada media. Setelah ditanam, botol kultur ditutup rapat, ditempatkan keruang kultur.    

Pengamatan Variabel Kultur

Eksplan yang diamati yaitu eksplan hidup, ekspla mati, kontaminasi, pembentukan akar, pembentukan tunas dan akar, dan perkembangan lainnya.

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1  Kultur Jaringan Pisang Abaca dengan Bantuan Zat Pengatur Tumbuh BAP, Kinetin dan NAA Pada Media Propagasi

            Seluruh konsentrasi BAP dan Kinetin yang diperlakukan terhadap eksplan bisa memicu induksi tunas adventif dari eksplan yang dikulturkan. Eksplan berupa tunas steril Abaca memperlihatkan respon perubahan sesudah diinkubasi pada media kultur in vitro. Pada permulaannya, pangkal eksplan tampak membesar dan waarna hijau menjadi lebih kuat. Tunas tercepat muncul pada 8,2 hari sesudah kultur. Berdasarkan data penelitian, konsentrasi BAP 6 ppm cenderung member imbas lebih baik pada tahap induksi tunas. Sedangkan kinetin 7 ppm memperlihatkan hasil jumlah tunas terbanyak.

            Pada tahap pengakaran tunas abaka, eksplan yang dipergunakan yaitu tunas mikro dengan jumlah daun 3 dan tinggi  3 cm yang berasal dari tahap induksi tunas. Semua perlakuan yang diberikan bisa memicu pertumbuhan akar dan seluruh eksplan yang dikulturkan pada tahap ini bisa membentuk akar. Akar pertama tumbuh pada hari ke-3 sesudah kultur. Rata-rata akar terbentuk pada hari ke-11 sesudah kultur. Eksplan yang dikultur pada media tanpa penambahan NAA paling gampang membentuk akar. Pada kondisi ini akar yang dihasilkan paling panjang tetapi jumlah akar lebih sedikit. Perlakuan NAA 1 ppm menghasilkan jumlah akar lebih banyak tetapi panjang akar lebih pendek dibandingkan dengan perlakuan 0 ppm. Berdasarkan hasil penelitian, perlakuan yang cenderung member hasil lebih baik pada tahap pengakaran tunas abaka yaitu pengkulturan pada media tanpa penambahan NAA.

            Tunas mikro yang dikulturkan pada media yang diperkaya dengan NAA juga membentuk akar liar. Semakin tinggi konsentrasi NAA, jumlah akar liar yang terbentuk semakin banyak lantaran auksin memacu perkembangan akar liar (Salisbury dan Ross, 1995).

Dari hasil pengamatan tersebut tampak bahwa penambahan auksin ke dalam media perakaran, eksplan tunas abaka bisa menginduksi akar lebih cepat dan menghasilkan akar paling panjang walaupun jumlah yang dihasilkan lebih sedikit di banding seluruh perlakuan yang lain. Hal ini diduga lantaran eksplan telah mengandung auksin endogen yang bisa memacu induksi akar. Salisbury dan Ross (1995) menyatakan, sel umumnya mengandung auksin cukup atau hamper cukup untuk memanjang secara normal.

            Peningkatan konsentrasi NAA di atas 1 ppm secara faktual menghambat pertumbuhan akar. Akar terbentuk lebih usang dengan jumlah cenderung berkurang dan lebih pendek. Hal ini disebabkan konsentrasi auksin yang tinggi menghambat pertumbuhan akar (Priyono,2001). NAA 1 ppm menghasilkan akar dalam jumlah lebih banyak tetapi panjang akar lebih pendek dibandingkan pada perlakuan tanpa pemberian NAA. Menurut Delvin (1975) dalam Abidin (1985) pemberian konsentrasi auksin yang relative tinggi mengakibatkan terhambatnya perpanjangan akar tetapi meningkatkan jumlah akar.

Berdasarkan data-data yang ada, diduga konsentrasi optimum NAA untuk pertumbuhan akar abaka terdapat antara rentang 0-1 ppm. Auksin dalam konsentrassi yang tepat sangat berperan aktif dalam proses diferensiasi sel, namun pada taraf yang melebihi konsentrasi optimum sanggup bersifat racun (Wareing dan Phillips, 1970 dalam  Priyono, 1993).

4.2 Kultur Jaringan beberapa Kultivar Buah Pisang (Musa paradisiaca l.) dengan Pemberian Campuran NAA dan Kinetin

Persentase hidup

            Dari hasil percobaan yang dilakukan sanggup dilihat bahwa, persentase hidup eksplan sangat bervariasi dan perlakuan NAA dan kinetin, kultivar pisang, dan interaksi keduanya tidak kuat nyata. Beberapa eksplan yang mati rata-rata disebabkan oleh pencoklatan dan jerawat mikroba. Pencoklatan salah satunya disebabkan oleh sintesi metabolit sekunder.

            Fitriani (2003) mendapat bahwa warna coklat kalus membuktikan sintesis senyawa fenolik. Sintesi senyawa fenolik dipacu oleh cekaman atau gangguan pada sel tumbuhan (Vickery dan Vickery, 1980). Pencoklatan juga disebabkan oleh adanya gen B. Menurut Purwanto(1991) keberadaan sejumlah genom B mempengaruhi tingkat kandungan fenol dan acara polyphenoloksidase, semakin tinggi pula acara enzim polyphenoloksidase. Hal ini ditunjukan dengan tingginya produksi phenol pada pisang kepok yang mempunyai genom BBB dan pisang raja yang mempunyai genom AAB, sedangkan pada pisang mauli pencoklatan lebih kecil.

Kontaminasi

   Kontaminasi pada materi tumbuhan yang dikulturkan sanggup terjadi lantaran adanya jerawat secara eksternal maupun internal. Usaha pencegahan kontaminasi eksternal dilakukan dengan sterilisasi permukaan materi tanaman. Inferksi internal tidak sanggup dihilangkan dengan sterilisasi permukaan (Widiastoety,2001).

Eksplan yang mengandung atau terinfeksi virus, kuman atau jamur akan menyebebkan kontaminasi pada tahap pertumbuhan. Selain itu, factor sterilitas ruangan juga sangat memilih terhadap kontaminasi. Pengambilan meristem sebagai eksplan harus dilakukan dalam ruang steril biar tidak tercemar (Sunarjono, 2002).

   Kontaminasi disebabkan oleh jamur, kuman dan cendawan. Kontaminasi oleh jamur terlihat terang pada media yang berwarna putih, sedangkan kontaminasi oleh bakteri, pada eksplan terlihat lender berwarna kuning sebagian lagi menempel pada media membentuk gumpalan yang basah. Jamur yang mengkontaminasi media san eksplan yaitu jamur-jamur menyerupai Aspergillus sp, Monera sp dan Penicillium sp (Setiyoko, 1995). Bakteri berupa bekteri gram positif dan yang semispesifik untuk pisang yaitu Pseudomonas solanacearum.

Saat pembentukan kalus

   Percobaan menunjukan bahwa gabungan NAA dan kinetin, kultivar pisang dan intraksi keduanya tidak kuat faktual terhadap ketika pembentukan kalus. Hal ini terjadi kemungkinan lantaran pembentukan kalus pada bakal buah pisang hanya dipengaruhi oleh kandungan auksin endogen saja.

Saat tumbuh tunas mikro dan jumlah tunas

   Dalam penelitian ini tunas tidak terbentuk. Saat tumbuh tunas dipengaruhi oleh tiga factor yaitu factor eksplan, media, dan lingkungan (Mante dan Tepper,1983). Factor lain yang mengakibatkan tidak terbentuknya tunas pada percobaan ini yaitu kombinasi NAA dan kinetin yang kurang tepat, dengan konsentrasi NAA terlalu rendak disbanding kinetin.

Saat pembentukan akar dan jumlah akar per tunas mikro

Pada percobaan ini tunas juga tidak terbentuk. Radian (1992) menemukan bahwa hingga 2 ahad sesudah subkultur akar pisang kepok dan pisang candi tidak tumbuh. Menurut Pierik (1987) ketika tumbuhnya akar juga dipengaruhi pertumbuhan tunas: tunas tumbuh dengan baik memacu pertumbuhan akar, apabila pertumbuhan tunas terhambat maka pertumbuhan akar pun terhambat. Terhambatnya pertumbuhan akar  juga disebabkan oleh tingginya konsentrasi kinetin dalam media.       

4.3 ‘Kultur Meristem” Pisang Barangan (Musa paradisiaca L.) Pada Media MS dengan Beberapa Komposisi Zat Pengatur Tumbuh NAA, IBA, BAP, dan Kinetin

Ekssplan hidup, mati dan kontaminasi

Eksplan yang hidup berkembang membentuk akar, membentuk tunas, pembesaran bonggol, dan sebagian kecil statis. Komposisi zat pengatur tumbuh yang dicobakan dalam media MS IBA, NAA, atau kinetin masih pada batas konsentrasi yang sesuai untuk kehidupan eksplan dan tidak mematikan eksplan.

Eksplan yang mati diduga disebabkan oleh teknik memotong kurang baik, eksplan memar, sterilisasi terlalu keras, kontaminasi dan lingkungan kurang sesuai. Kontaminasi dijumpai pada media M4 dan M5 masing-masing 40% dan pada M3, M6, M8 sebesar 20%. Jenis kontaminan jamurdan kuman tersebar dipermukaan media. Kontaminan jamur sudah tampak 1 ahad sesudah tanam, diperkirakan kontaminan berasal dari lingkungan. Karena jamur tumbuh dipermukaan media kemudian membentuk hifa dan menutupi permukaan media dan eksplan, sehingga menjadikan eksplan tertekan dan mati.

Pembentukan akar dan tunas

Eksplan yang hidup berkembang membentuk akar dan tunas, dan perkembangan lainnya. Pembentukan akar terlihat pada ahad ke 2 hingga ahad ke 11, dari 4% hingga 49%. Eksplan sanggup menghaslkan akar pada semua media yang dicobakan. Ada kecenderungan perlakuan tanpa ZPT memungkinkan persentasi tumbuhan berakar lebih tinggi dari perlakuan lainnya. Kandungan hormon internal mungkin sudah baik untuk menumbuhkan akar eksplan. Penambahan ZPT justru mengurangi pembentukan akar, terutama penambahan auksin sintetik NAA. Eksplan yang telah membentuk pucuk juga akan disusul dengan pembentukan akar, hal ini lantaran auksin internal akan diproduksi pada tunas tanaman.

Eksplan bertunas pada semua media yang dicobakan. Pembentukan tunas dipengaruhi oleh zat pengatur tumbuh sitokinin. Penambahan ZPT eksogen diperkirakan malah mengganggunkeseimbangan hormon dalam eksplan,namun masih dalam kisaran yang sanggup ditoleransi eksplan.

Dengan hormon endogen eksplan bisa membentuk tunas dan akar. ZPT eksogen yang diharapkan sanggup meningkatkan pembentukan akar dan tunas pada pisang barangan, sebaliknya terlihat memperlambat, namun masih sanggup ditoleransi eksplan.

Bila pemotongan akar atau batang secara in vitro dengan pemberian sitokinin eksogen, pemanjangannya sering terhambat tetapi potongan –potongan tersebut menjadi lebih gemuk, lantaran terjadinya pembesaran sel-selnya secara radial. Eksplan sanggup dikatakan mengalami pembesaran sel, sehingga bonggol tampak bertambah besar.

Pembebtukan kalus,  browning dan pertumbuhan stagnasi tidak terlihat secara terang dalam jurnal penelitian ini, hal ini disebabkan eksplan berasal dari tumbuhan yang sudah menyesuaikan diri dirumah kaca, tumbuhan telah beretiolasi dan tidak membentuk fenolat yang nyata.

BAB V

KESIMPULAN

1.    Perlakuan terbaik sebagai potongan metode regenerasi dari penelitian ini yaitu induksi tunas. memakai BAP 6 ppm atau kinetin 7 ppm dan pengakaran tunas mikro abaka dengan penambahan 1 ppm NAA.

2.    Penambahan gabungan zat pengatur tumbuh NAA dan kinetin tidak kuat faktual dan tidak terjadi interaksi antara gabungan NAA dan kinetin dengan kultivar pisang terhadap semua peubah pengamatan.

3.    Komposisi ZPT IBA atau NAA dan BAP atau kinetin masih sesuai untuk media eksplan dan media tanpa penambahan  auksin maupun sitokinin membentuk akar dan tunas dengan baik yaitu sebesar 100%.

DAFTAR PUSTAKA

Abidin,Z. 1985. Dasar-dasar Pengetahuan perihal Zat Pengatur Tumbuh, Angkasa, Bandung.

Avivi,S dan Ikrarwati, 2004, Mikropagasi Pisang Abaca (Musa textilis Nee) Melalui Teknik Kultur Jaringan, Jurnal Ilmu Tanah Vol.11 No.2

Gunawan, L.W.1990. teknik kultur jaringan tumbuhan. PAU Bioteknologi. IPB. Bogor. P. 304.

Nisa,C dan Rodinah, 2005, Kultur Jaringan Beberapa Kultivar Buah Pisang (Musa paradisiaca L.) dengan Pemberian Campuran NAA dan Kinetin, Jurnal Bioscientiae, Vol 2, No.2.

Priyono. 2000. Perbanyakan Abaka (Musa textillis Nee) melalui Kiltur Mata Tunas Secara In vitro. Pelita Perkebunan 9(2): 129-133.

Purwanto, D.1991. imbas ukuran materi tanam terhadap keberhasilan perbanyakan beberapa varietas pisang (Musa paradisiacal L.) dengan metode kultur jaringan. Skripsi fakultas pertanian UNIBRAW. Malang.

Salisbury, F.B. dan C.W. Ross. 1995. Fisiologi Tumbuhan. Jilid 3. Edisi Bahasa Indonesia. Penerbit ITB, Bandung.

Sitohang,N, 2004, “Kultur Meristem” Pisang Barangan(Musa paradisiaca L.) pada Media MS dengan Beberapa Komposisi Zat Pengatur Tumbuh naa, iba, Dan Kinetin, Unika Santo Thomas Medan.

Wibowo, A. 1998. Abaca (Musa textillis Nee) Penghasil Serat. Duta Rimba XXIV (222): 31-37.

Sumber http://luqmanmaniabgt.blogspot.com

Share this post

Berlangganan update artikel terbaru via email: